中文名稱：熒光增白劑28

　　中文別名：2,2’-(1,2-亞乙烯基)二[5-[[4-[二(2-羥乙基)氨基]-6-(苯氨基)-1,3,5-三嗪-2-基]氨基]]苯磺酸;熒光增白劑;熒光增白 28;熒光增白劑 CBS –X(L);2,5-二(5-叔丁基苯并惡唑-2’-)噻吩;

　　英文名稱：4,4'-bis({4-anilino-6-[bis(2-hydroxyethyl)amino]-1,3,5-triazin-2-yl}amino)stilbene-2,2'-disulfonic acid

　　英文別名：Fluorescent Brightener 28;FLUORESCENT BRIGHTENER 28;Calcofluor White M2R,Tinopal UNPA-GX;

熒光增白劑28技術(shù)指標(biāo)：

　　CAS號(hào)：4404-43-7

　　分子式： C 40H 44N 12O 10S 2

　　分子量：916.98200。

　　應(yīng)用：用于真菌染色。

　　外觀：黃色至灰色粉末

　　折射率：1.744

　　熔點(diǎn)：290oC

　　密度：1.598 g/cm3

熒光增白劑28的使用范圍及其優(yōu)點(diǎn)：

　　熒光增白劑28(Fluorescent Brightener 28)核酸探針傳統(tǒng)的標(biāo)記物是用放射性同位素，多用32PdNTP、3HdNTP、35SdNTP等。用放射性同位素標(biāo)記核酸有以下優(yōu)點(diǎn)：

　　(1) 靈敏性高：一般可達(dá)到0.5～5pg或更低濃度核酸的檢測(cè)水平，可以檢測(cè)較少量或拷貝數(shù)少的基因組(可延長(zhǎng)曝光時(shí)間或增敏屏增敏)。

　　(2) 熒光增白劑28(Fluorescent Brightener 28)特異性高：用放射自顯影法，樣品中存在的無關(guān)核酸或非核酸成分不會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，準(zhǔn)確率高，假陽性率低。

　　(3) 方法簡(jiǎn)便。所以，放射性同位素標(biāo)記核酸探針在一些有條件的單位，作為主要的標(biāo)記方法仍在使用。

　　RNA定量方法與DNA定量相似。RNA在260nm波長(zhǎng)處有*的吸收峰。因此，可以用260nm波長(zhǎng)分光測(cè)定RNA濃度，OD值為1相當(dāng)于大約40μg/ml的單鏈RNA。如用1cm光徑，用 ddH2O稀釋DNA樣品n倍并以ddH2O為空白對(duì)照，根據(jù)此時(shí)讀出的OD260值即可計(jì)算出樣品稀釋前的濃度：

　　RNA(mg/ml)=40×OD260讀數(shù)×稀釋倍數(shù)(n)/1000

　　RNA純品的OD260/OD280的比值為2.0，故根據(jù)OD260/OD280的比值可以估計(jì)RNA的純度。若比值較低，說明有殘余蛋白質(zhì)存在;比值太高，則提示RNA有降解。

熒光增白劑28注意事項(xiàng)：

　　1. 樣品量和Trizol的加入量一定要按步驟(1)的比例，不能隨意增加樣品量或減少Trizol量，否則會(huì)使內(nèi)源性RNase的抑制不完全，導(dǎo)致RNA降解。

　　2. 實(shí)驗(yàn)過程******嚴(yán)格防止RNsae的污染。

　　3. 熒光增白劑28(Fluorescent Brightener 28)常溫運(yùn)輸，室溫干燥保存，有效期一年。